Endométriose et migration cellulaire
Une recherche article de l'Université médicale de Chine ont étudié comment un long ARN non codant (lncRNA) connu sous le nom de HOTAIR contribue au développement de l'endométriose.
L'endométriose est une maladie qui affecte le système reproducteur féminin en altérant la muqueuse utérine ou endomètre. Cette muqueuse devrait être présente à l'intérieur de l'utérus, mais dans cette maladie, elle est présente à l'extérieur de l'utérus. Les symptômes courants sont souvent des douleurs pelviennes et l'infertilité.
Les schémas de migration et de prolifération des cellules de l'endométriose sont similaires à ceux du cancer. L'endométriose peut même affecter d'autres organes, comme la vessie, par le biais d'une endométriose infiltrante profonde (EIP). L'identification de mesures préventives potentielles contre cette maladie est cruciale pour la recherche d'un traitement.
Les ARNnc peuvent se former au cours du développement d'une maladie et sont capables d'influencer les processus de transcription. HOTAIR est un type de lncRNA qui agit comme un échafaudage moléculaire et a été surexprimé dans divers cancers. Par la manipulation de l'épigénome, il peut augmenter l'invasivité des cellules cancéreuses et les métastases. L'évaluation de son expression dans le cancer de l'ovaire pourrait fournir une méthode de traitement prometteuse.
Des patientes atteintes d'endométriose et des patientes saines ont été incluses dans l'étude. Des échantillons d'ARN ont été extraits des leucocytes du sang périphérique. Le génotypage Taqman a été utilisé pour détecter les polymorphismes de nucléotides simples (SNP). Les SNP fonctionnels liés à la maladie ont été sélectionnés en fonction de leur capacité à modifier la structure de l'ARN. Les SNP présents dans le miRNA peuvent influencer la susceptibilité à l'endométriose. Des tests PCR ont été utilisés pour mesurer les niveaux de HOTAIR chez les sujets testés et pour effectuer une mutagenèse dirigée.
Les cellules transfectées par des gènes ont été identifiées par la présence de la protéine fluorescente verte (GFP). La synthèse de l'ADN a été contrôlée par une coloration immunofluorescente. Toutes les cellules ont été ensemencées dans un essai de migration cellulaire à 96 puits avec Oris Les bouchons sont fournis par Platypus Technologies. Les bouchons créent une zone exempte de cellules à l'intérieur des puits de cellules. Un masque de détection Oris a également été utilisé pour quantifier les cellules migrantes.
L'analyse des haplotypes, qui est utilisée pour identifier les allèles liés sur le même chromosome, a été réalisée pour identifier les allèles favorables à la maladie chez les sujets testés. Ces allèles ont été comparés aux données de distribution allélique. Les résultats ont montré que les sujets présentant l'haplotype G-G de rs1838169-rs17720428 étaient les plus susceptibles de développer une endométriose. Les substitutions génétiques à l'emplacement de ces haplotypes peuvent entraîner des modifications de la thermostabilité de la structure HOTAIR. Il a été constaté que les niveaux de HOTAIR dans les cellules sanguines contenant les deux haplotypes G-G sont 1,8 fois plus élevés que ceux des cellules de type sauvage (WT). En outre, la structure HOTAIR présentait également une plus grande stabilité au niveau des deux SNP fonctionnels. La figure ci-dessous présente les résultats relatifs aux niveaux de HOTAIR WT et GG dans les cellules sanguines.
On a constaté que les régulateurs épigénétiques associés à HOTAIR étaient également plus nombreux chez les sujets atteints d'endométriose. Des miARN anti-HOTAIR ont été exposés à des cellules cancéreuses ovariennes claires afin d'identifier un traitement possible de l'endométriose. Les résultats ont montré que les anti-HOTAIR contribuaient à supprimer la croissance et la mobilité des cellules.
Les variations génétiques au niveau d'allèles spécifiques de HOTAIR ont pu affecter les structures locales de l'ARN et indiquer le degré de susceptibilité à l'endométriose. Un risque accru d'endométriose a été identifié en déterminant les régions d'exon qui stabilisent la structure de HOTAIR (rs1838169 et rs17720428).
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