Endometriosis y migración celular
Una investigación artículo de la Universidad Médica de China investigaron cómo un ARN no codificante largo (lncARN) conocido como HOTAIR contribuye al desarrollo de la endometriosis.
La endometriosis es una enfermedad que afecta al aparato reproductor femenino alterando el revestimiento uterino o endometrio. Este revestimiento debería estar presente dentro del útero, sin embargo, en esta enfermedad está presente fuera del útero. Los síntomas más comunes suelen ser dolor pélvico e infertilidad.
Los patrones de migración y proliferación celular de la endometriosis son similares a los del cáncer. La endometriosis puede afectar incluso a otros órganos, como la vejiga urinaria, a través de la endometriosis profundamente infiltrante (DIE). Identificar posibles medidas preventivas de esta enfermedad es crucial para encontrar una cura.
Los lncARN pueden formarse durante el desarrollo de enfermedades e influir en los procesos transcripcionales. HOTAIR es un tipo de lncARN que actúa como andamio molecular y se ha sobreexpresado en varios tipos de cáncer. Mediante la manipulación del epigenoma, puede aumentar la invasividad y la metástasis de las células cancerosas. Evaluar su expresión en el cáncer de ovario podría proporcionar un método de tratamiento prometedor.
En el estudio se incluyeron tanto pacientes con endometriosis como sanas. Se extrajeron muestras de ARN de leucocitos de sangre periférica. Se utilizó el genotipado Taqman para detectar polimorfismos de nucleótido único (SNP), seleccionándose los SNP funcionales relacionados con la enfermedad en función de su capacidad para alterar la estructura del ARN. Los SNP presentes en el miARN pueden influir en la susceptibilidad a la endometriosis. Se utilizaron pruebas PCR para medir los niveles de HOTAIR en los sujetos de ensayo y llevar a cabo mutagénesis dirigida al sitio.
Las células transfectadas genéticamente se identificaron con la presencia de la proteína verde fluoresceína (GFP). La síntesis de ADN se monitorizó mediante tinción inmunofluorescente. Todas las células se sembraron en un ensayo de migración celular de 96 pocillos con Oris suministrados por Platypus Technologies. Los tapones crean una zona libre de células dentro de los pocillos. También se utilizó una máscara de detección Oris para cuantificar las células migradas.
El análisis de haplotipos, que se utiliza para identificar alelos vinculados en el mismo cromosoma, se realizó para identificar alelos favorables a la enfermedad en los sujetos de la prueba. Estos alelos se compararon con los datos de distribución alélica. Los resultados indicaron que las personas con el haplotipo G-G de rs1838169-rs17720428 presentaban la mayor asociación con el desarrollo de endometriosis. Las sustituciones genéticas en estas localizaciones del haplotipo pueden causar cambios en la termoestabilidad de la estructura HOTAIR. Se descubrió que los niveles de HOTAIR en las células sanguíneas que contienen los dos haplotipos G-G son 1,8 veces superiores a los de las células con fondo genético de tipo salvaje (WT). Además, la estructura HOTAIR también presentaba una mayor estabilidad en los dos SNP funcionales. En la figura siguiente se muestran los resultados relativos a los niveles de HOTAIR WT y GG en las células sanguíneas.
Se descubrió que los reguladores epigenéticos asociados a HOTAIR también aumentaban en los sujetos con endometriosis. Se expusieron miARN anti-HOTAIR a células de cáncer claro de ovario para identificar un posible tratamiento de la endometriosis. Los resultados mostraron que los anti-HOTAIR contribuían a suprimir el crecimiento y la movilidad celular.
Las variaciones genéticas en alelos específicos de HOTAIR pudieron afectar a las estructuras locales del ARN e indicar el grado de susceptibilidad a la endometriosis. Se identificó un mayor riesgo de endometriosis mediante la identificación de las regiones de exones que estabilizan la estructura de HOTAIR (rs1838169 y rs17720428).
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