用于癌症研究的细胞侵袭测定

细胞侵袭基底膜是癌症转移的一个重要步骤。 在本博客中，我们将讨论细胞侵袭检测及其在癌症研究中的应用。 当癌细胞穿过原发器官的基底膜，随后扩散到身体的不同器官并形成继发性肿瘤时，就会发生转移[1]。  

细胞侵袭试验是癌症研究的重要工具。 研究癌症的科学家通过细胞侵袭试验来测量细胞在细胞外基质中的移动。通过改变细胞培养条件（如添加新药），科学家们可以确定阻止或加速细胞侵袭的条件。 通过这些研究，可以确定癌症的新疗法，以便进行潜在治疗。

简单可靠的细胞检测，实现科学突破

为了加快癌症研究的科学突破，鸭嘴兽科技公司推出了一种简单、可重复的检测平台，用于研究细胞侵袭。 该平台 豪利时^TM 平台 由 96 孔板组成，带有可拆卸的 "塞子"，可形成一个中央无细胞检测区。 在细胞侵袭检测中，检测区可填充所选的细胞外基质（如胶原蛋白、基底膜提取物 (BME)、透明质酸、水凝胶等）。 细胞侵入检测区的基质中，细胞侵入的程度和速度很容易通过平板阅读器或显微镜图像进行实时量化。 与其他方法相比，Oris^TM 平台为研究细胞侵袭提供了独特的优势：

• 非常简单的设置和直接的数据解读
• 准确识别抑制或刺激细胞侵袭的特定药物或条件
• 可重复的检测区域可实现高精确度的检测结果
• 支持细胞侵袭的实时和终点测量
• 轻松分析：
  • 使用豪利时^TM 使用平板阅读器量化入侵的检测掩码
  • 正在进行图像分析？无需染色或掩膜
• 结果与生理相关：细胞直接侵入细胞外基质；无需人工膜。

细胞侵袭试验示例

下面的实验说明了Oris的使用方法^TM 研究细胞通过基底膜提取物（BME）侵袭的平台。 进行该试验所需的主要材料包括: (1) 豪利时^TM 涂有 BME 的细胞迁移试验，(2) BME 溶液，(3) 细胞和 (4) 细胞培养基。 将活体染色的 HT1080 纤维肉瘤细胞培养在 Oris^TM 板上涂有 BME。 经过一段时间的孵育使细胞附着后，取下形成中央无细胞检测区的塞子，用冷冻的 BME 溶液填充平板孔。 随后，将细胞包埋在 BME 中，在 37 °C 下培养。 在不同的时间间隔收集细胞培养的图像，并用 ImageJ 进行分析。 

[请参阅奥利斯详细规程^TM 细胞迁移试验]

下图捕捉了细胞培养物在移除瓶塞前和在 BME 中培养 40 小时后的代表性图像。 

如图所示，Oris^TM 平台允许细胞附着在圆形无细胞检测区周围。 这个充满 BME 的检测区可以轻松描述细胞入侵的特征：进入圆形检测区的细胞很容易被量化。 

在这种情况下，使用 ImageJ 测量无细胞区的面积来确定细胞入侵的程度：面积越小，细胞入侵 BME 的程度越大。 如下图所示，在培养 24 小时内，大量细胞侵入 BME。 培养时间越长，细胞侵入率越高。    

结 论

该实验表明，HT1080 的细胞明显侵入基底膜。 后续实验可以探索影响细胞侵袭的参数，如（i）基底膜的硬度，（ii）培养基中的药物和药物浓度，或（iii）基底膜中是否存在二次细胞培养（共培养）。 总之，Oris^TM 平台为细胞侵袭检测提供了一个简单可靠的平台。 

参考文献：

[1] T. A. Martin 等人，"癌症入侵和转移：分子和细胞视角"，《居里夫人生物科学数据库》[互联网]：居里夫人生物科学数据库 [Internet].奥斯汀（德克萨斯州）： Landes Bioscience; 2000-2013. 链接

[2] M. Malboubi 等人，"用于研究癌细胞在密闭环境中迁移时变形的物理极限的开放式微流控装置"，《微电子。144, 16 Aug. 2015 pp.42-45. 链接