细胞检测失败的 5 大原因

在充满活力的生物研究领域，细胞检测是揭开细胞和分子水平奥秘的重要工具。这些检测方法在药物发现、毒理学和其他各个领域都举足轻重，它们经过精心设计，用于测量细胞在各种条件下的反应。然而，在获得精确可靠结果的过程中，往往会遇到许多无法预料的障碍。方案中的一点偏差或微小的污染都可能导致检测失败，从而使数个小时的人力和资源付诸东流。

在本综合指南中，我们将深入探讨导致细胞检测失败的五大原因。通过了解这些常见陷阱，研究人员可以掌握必要的知识来解决这些问题，从而提高结果的准确性和可靠性。因此，无论您是经验丰富的研究人员还是该领域的新手，了解这些因素都能大大提高细胞检测的成功率。

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#1 - 生物污染

不小心处理设备或细胞培养板造成的污染.

污染可能来自化学或生物手段。为避免污染，科学家应对所有设备、地面和柜台进行例行清洁。在使用化学品时，最好确保在运输容器之前盖紧所有盖子。在处理细胞时，应确保一次只处理一个细胞系，并在适当时更换移液器吸头，以避免交叉污染。

无菌技术不当.

适当 无菌技术 正确的无菌技术包括清洁细胞实验室的所有表面，包括细胞培养罩的外部。应使用 70% 酒精喷洒培养罩，并且只能将无菌材料放入培养罩。任何时候都应戴上手套，进入培养罩后应始终用 70% 酒精喷洒。所有细胞工作都应在细胞罩内进行，以尽可能保持细胞环境的清洁。

#2 – 储存条件不当

未在建议温度下储存的平板、细胞、试剂和设备

研究所有试剂和细胞系的储存温度和条件非常重要。试剂储存不当会导致其成分不再具有预期效果，从而使试剂失去作用。细胞系都是不同的，因此了解保持细胞系生长的合适温度和条件是任何实验的关键。定期检查所有冰箱、冰柜和培养箱的状况，确保所有系统正常工作，避免影响任何实验或试剂，也是一种良好的做法。

#3 - 移液技术

移液技术不当；清洗步骤执行不力

移液时，例如在清洗步骤中，切勿以过激的方式分配液体。

用力移液会增加附着在平板表面的细胞脱落的几率。如果细胞从平板上脱落后又被水冲走，就会影响实验效果。如果您要进行洗涤步骤，我们认为不要将移液器吸头直接对准附着细胞的平板表面。相反，您可以将吸头对准孔壁，以减少任何强力冲击。如果您必须将溶液直接喷射到板底，请记住对细胞要温柔。

#4 - 细胞健康状况不佳

细胞培养物未达到最佳通过率范围；药物浓度范围不正确导致细胞中毒；补充剂浓度不当导致生长不良

细胞系的部分条件是培养基和补充添加剂。细胞系需要独特的培养基和添加剂混合物，为细胞的健康生长提供适当的营养。请务必研究哪种组合最适合所选细胞系。在使用不同浓度的药物进行实验时，一定要找到使细胞暴露的理想范围。不正确的移液或计算错误会导致浓度偏离预期，从而改变细胞在这些条件下的行为方式。

#5 - 细胞粘附性差

电池类型选择错误（使用需要较长附着时间的电池）

要选择合适的细胞类型，应考虑所要进行实验的目的。实验是否需要在特定条件下培养细胞？实验是否需要特定物种的培养？进行实验所需的细胞量是多少？一旦回答了这些基本问题，实验者就可以探索各种选项，如粘附与非粘附细胞、连续或有限细胞系、衍生细胞系的物种等。

错误选择平板涂层（如组织培养与纤维连接蛋白或胶原蛋白）

细胞培养瓶和培养皿有各种形状和大小，因此很难确定哪种类型最适合特定用途。这些容器还可以用各种基质进行处理/涂层，从而有效地增加了更多的选择。一旦选择了细胞系，就应该使用与所选细胞最兼容的适当基质涂层。这将确保细胞的正常生长/迁移，并产生最佳的实验结果。

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结论

本报告阐明了细胞检测中的五大绊脚石，揭示了必须一丝不苟的复杂环节。从移液的细微差别到细胞类型和平板的关键选择，每一步都至关重要。当我们克服了这些常见的陷阱后，通往稳健、可重复结果的道路就变得更加清晰了。通过直面这些问题并培养精确性和意识文化，我们为更成功的细胞检测铺平了道路，推动了细胞研究的发展。