利用成纤维细胞重新想象心血管疾病的治疗方法

间充质向内皮细胞转化(MEndoT)是一个令人兴奋的研究领域,尽管还存在争议,但它可能从根本上改变我们治疗心血管疾病的方法。其中的关键是了解成纤维细胞--一种以在组织稳态和疾病中发挥作用而著称的细胞--在新血管形成过程中的潜在作用。在这一探索之旅中,Oris通用细胞迁移组装套件已被证明是一个重要的工具。

成纤维细胞在组织工程中的潜力

人们对人类肺成纤维细胞,特别是 MRC-5 细胞的内皮分化能力进行了深入研究。 研究人员的目标 我们的目的是研究这些成纤维细胞能否变成内皮细胞(EC)--这些细胞对血管的形成至关重要。这些细胞被培养在 Matrigel 水凝胶之上或嵌入其中。在血管生成信号的作用下,这些成纤维细胞转化为毛细血管样网络,浓度较高时,它们甚至侵入Matrigel,形成干细胞样球体,并萌发形成三维结缔组织网络。

这一发现是血管组织工程领域的一个重要里程碑。能够制造出生物相容性血管移植物,并能在患者体内生长、重塑和修复,这将改变游戏规则。然而,还有许多重大障碍需要克服。采集自体心肌细胞(来自患者自身的细胞)的过程在技术上具有挑战性,而这些细胞的来源和增殖能力有限,使得这一过程更加艰巨。成纤维细胞转化为心肌细胞的潜力可能是克服这些挑战的关键。

细胞侵袭试验的作用

为了深入探讨这个问题,研究人员使用了 Oris 通用细胞迁移组装套件 来研究 MRC-5 细胞的侵袭。这一工具有助于揭示成纤维细胞在 Matrigel 基质中的行为。

细胞侵入 Matrigel 前(左)和后(右)微孔内细胞示意图

研究人员使用 Oris 通用迁移试剂盒研究细胞侵袭的方法如下:

"试剂盒的每个 96 孔板都有细胞播种塞(直径 2 毫米),用于在每个孔的中心形成检测区。96 孔板的各孔涂上 50 μL/ 孔的稀释 Matrigel®(100μg/mL)。将平板置于 37° C、5% CO2 培养箱中,让生物基质材料聚合 2 小时,以研究 MRC-5 细胞的侵袭。2 小时后,将培养板从 37° C 中取出,并放置细胞生长阻滞剂。一个没有放置细胞塞的孔作为阳性对照。将 MRC-5 细胞(100 μL/孔,100,000-400,000 cells/mL 储存液)播种到平板的每个孔中。将含有 Oris™ Cell Seeding Stoppers 的播种板在加湿室(37°C,5% CO2)中培养过夜,以便细胞附着。细胞附着到基质上后,取出隔板。去除培养基,用 100 μL 无菌 PBS 冲洗孔。清洗后,加入 100 μL 培养基,然后将细胞板冷却至 4°C 5 分钟。将 4-8 mg/mL 的 Matrigel® 稀释,在冰上制备基质表层。加入 50μL Matrigel® 表层。加入两层 Matrigel™ 可确保检测的是侵袭,而不是二维伤口愈合迁移。然后将细胞平板置于 37° C,让生物基质表层聚合。30 分钟后,向每个孔中加入 100 μL/孔的额外培养基,然后将细胞板置于湿润室(37°C,5% CO2)中培养,以允许细胞侵入。24、48 和 72 小时后对细胞进行显微镜检查,以监测侵袭的进展。进行三次独立的生物实验,采用学生 t 检验进行统计分析。拍摄的图像由 WimScratch(Wimasis 图像分析)进行量化"。

学分 N.F. Theodoroula et al.

他们的观察结果表明,MRC-5 细胞以时间依赖性的方式侵入 Matrigel,这进一步支持了研究结果,并强调了成纤维细胞在血管生成中的潜在作用。

从本质上讲,这项研究开创了MRC-5肺成纤维细胞可直接转化为EC的变革性理念。这一创新得益于 Oris 通用细胞迁移组装工具包的关键作用,该工具帮助研究人员检查并定量分析了细胞侵袭率。该工具帮助研究人员检查并定量分析了细胞的入侵率,从而以一种前所未有的方式对这些细胞的行为进行了研究。

血管组织工程的未来

总之,成纤维细胞在血管生成中的潜在作用及其向EC的直接转化是一项突破性发现。由于 Oris 通用细胞迁移组装试剂盒在这项研究中发挥了关键作用,科学家们距离创造能克服过去挑战的治疗模式又近了一步,探索了成纤维细胞作为一种新细胞来源在体外工程三维组织中形成血管网络的潜力。

这项研究进一步证明了Oris通用细胞迁移组装套件等创新工具的价值,它将推动医学研究的发展。科学家们将继续发掘成纤维细胞等细胞隐藏的潜力,寻求创新、有效的医疗解决方案,这是一个令人兴奋的时刻。