Inflamación crónica y migración de células de cáncer de colon
En una nueva investigación estudiar de la Universidad Médica y Dental de Tokio (Japón), investigaron la influencia de la inflamación crónica en los fenotipos infecciosos de la colitis ulcerosa (CU), una enfermedad intestinal.
Las mutaciones genéticas se detectan habitualmente en el examen endoscópico de la CU. La dificultad para identificar los cánceres asociados a la colitis (CAC) se debe al obstáculo que supone la inflamación crónica. En la actualidad, aún no se ha identificado el efecto de la inflamación potencial en las neoplasias esporádicas. Las neoplasias esporádicas proporcionan un diagnóstico más preciso de la CU en comparación con la identificación de los CAC. En este estudio, se creó un modelo inflamatorio a largo plazo de una línea celular de cáncer correccional (LS174T).
La línea celular LS174T, derivada del adenocarcinoma de colon, se cultivó con flagelina, interleucina y factor de necrosis tumoral (TNF). La flagelina es la principal responsable de la adhesión y la invasión de las células huésped. La interleucina modula el comportamiento celular a través de la señalización celular. El TNF es secretado por las células inflamatorias y contribuye a la proliferación y diferenciación celular.
A continuación, se utilizó la tecnología CRISPR para mutar el exón 10 de TP53 en células LS174T. Las células mutadas resultantes tenían una menor expresión de genes descendentes de P53. Se utilizaron ensayos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real para mostrar los niveles de expresión de genes relacionados con la invasividad del cáncer y analizar genes de progresión del ciclo celular y genes marcadores de células madre. Un ensayo MTS midió la proliferación celular para indicar la relación de absorbancia en la línea celular.
Se utilizó el ensayo de migración celular Oris de Platypus Technologies para evaluar más a fondo los fenotipos malignos midiendo la capacidad de invasión de las células LS174T. Platypus Technologies Ensayo de migración celular Oris permiten una evaluación reproducible, exacta y precisa de la migración celular.
Los resultados generados a partir del ensayo de migración celular y otras herramientas indicaron que las células LS174T expuestas a reactivos inflamatorios presentaban una mayor inducción de interleucina-8 (IL-8). La IL-8 es una citocina quimioatrayente que activa los neutrófilos en regiones inflamatorias. Los experimentos realizados en esta investigación indicaron los efectos de la inflamación a largo plazo en las células LS174T. Durante un periodo de 60 semanas, se produjo continuamente un gen descendente NF-kB p65, lo que indica una inflamación a largo plazo. Se observó que la eliminación de los estímulos inflamatorios a menudo restablecía los niveles normales en distintos análisis. La señalización NF-kB de las células LS174T inducida por la inflamación crónica se restableció a niveles normales tras la eliminación de los estímulos inflamatorios. Además, la proliferación y la viabilidad de las células LS177T también se restablecieron a niveles normales tras eliminar los estímulos inflamatorios. Por lo tanto, se demostró que la inflamación crónica promovía la migración y la invasión de las células LS174T.
La invasividad se restableció a niveles normales tras la eliminación de los estímulos inflamatorios. Esta inflamación crónica impidió la producción de Lgr5, un marcador de células madre cancerosas. La invasividad aumentó en las células con mutación TP53.
En resumen, esta investigación demostró que la eliminación de los estímulos inflamatorios permitía que la invasividad volviera a niveles normales. De este modo, se revela una elevada plasticidad celular en células individuales de cáncer colorrectal.
Referencias:
ES 
EN 
ZH 
JA 
KO 
DE 
FR