Eine Einführung in Wundheilungstests

Wundheilungstests sind Standard-In-vitro-Methoden zur Untersuchung der kollektiven Zellmigration in zwei Dimensionen. Bei Wundheilungstests wird ein zellfreier Bereich in einer konfluenten Monoschicht durch physikalischen Ausschluss oder Entfernung der Zellen aus dem Bereich durch thermische, chemische oder mechanische Schädigung gebildet. Die Exposition gegenüber diesem zellfreien Bereich führt dazu, dass die Zellen in die Lücke wandern.

Verständnis der Bogenmigration

Die Blattmigration ist die Art der kollektiven Zellmigration, die mit dem Wundheilungstest untersucht wird. Diese Migration wird von endothelialen und epithelialen Monolayern gezeigt, die sich in zwei Dimensionen bewegen und dabei ihre interzellulären Verbindungen beibehalten.

Die Blattmigration kann bei einer Reihe von Prozessen stattfinden, darunter Krebsmetastasen, Gewebeverletzungen und die embryonale Morphogenese. Es gibt ein komplexes Zusammenspiel von mechanischen Kräften, biomedizinischen Kaskaden und molekularen Wechselwirkungen, die dadurch ausgelöst werden, dass die zelluläre Monolage dem Raum ausgesetzt wird, wenn die Zellen mit dem Spalt im Wundheilungsversuch in Kontakt kommen.

Welche Informationen liefern die Wundheilungstests?

Die Informationen, die am häufigsten aus Wundheilungstests gewonnen werden, sind die Lückenschlussrate. Dies ist ein Maß für die Geschwindigkeit der kollektiven Bewegung der Zellen. In einem Standardexperiment wird die Gap-Closure-Rate unter einer Reihe von Bedingungen quantifiziert, z. B. durch Veränderung der Zusammensetzung der extrazellulären Matrix, Behandlung der Zellen mit RNA-Interferenz oder Veränderung einer Reihe von Umgebungsvariablen einschließlich der Substratsteifigkeit.

Wundheilungstests können auch leicht für Anwendungen mit mittlerem und hohem Durchsatz angepasst werden, z. B. für die Arzneimittelentdeckung und das Screening kleiner Moleküle.

Vorbereitung von Wundheilungstests

Bei Wundheilungstests werden Zellen verwendet, die aus primären Isolierungen von Blutgewebe oder Zelllinien stammen. Reproduzierbare Zellkulturbedingungen sind entscheidend für stabile Phänotypen, die die Grundlage für erfolgreiche Tests bilden, und die Bedingungen müssen so zuverlässig wie möglich sein.

Im Allgemeinen werden Wundheilungstests mit einer dünnen Schicht von Zellen durchgeführt, die auf einem Kunststoff- oder Glassubstrat kultiviert wurden. Die meisten Epithel- und Endothelzellen haben dünne Zellschichten, die leicht zu erhalten sind, da sie konfluente Monolagen bilden.

Wundheilungstests sollten zu dem Zeitpunkt durchgeführt werden, an dem die Zellen konfluent werden, da die Ergebnisse mit zunehmender Reifung der Monolayer variieren können.

Bei der Vorbereitung von Wundheilungstests ist es auch wichtig, die zugehörige extrazelluläre Matrix zu berücksichtigen. Einige Zelltypen können direkt auf Kunststoff- oder Glassubstraten wachsen, während andere eine Beschichtung aus Kollagen, Gelatine oder Fibronektin benötigen, um zu haften.

Erfahren Sie mehr über Wundheilungstests

Zellmigrations-Assay-Kits bieten konsistente Detektionsbereiche, die eine hohe Genauigkeit, Reproduzierbarkeit und Präzision der Experimente gewährleisten. Platypus Tech bietet auf seiner Website eine Fülle von Informationen, die Ihnen bei Ihren Wundheilungsversuch Experimente. Wenn Sie mehr erfahren oder mit einem Experten diskutieren möchten, besuchen Sie die Website noch heute.