表面コーティングは細胞移動に影響するか?

表面コーティングが細胞の動きに重要な役割を果たしていることを示す実験結果

細胞遊走実験を行う際、長年の疑問がある: 特定の種類の細胞を培養するには、どのような表面コーティングを使用すべきか? で働く科学者たち。 がん研究, 創傷治癒あるいは 創薬 利用する 細胞培養 で重要な実験を行い、生物学的メカニズムの理解を進める。 特に 細胞移動 細胞の動きに影響を与える条件や物質の特徴を明らかにすることができる。 例えば オリスTM 細胞移動アッセイ 特定に成功 タンパク質, mRNA そして 酸化防止剤 腫瘍細胞の遊走を抑制する。 

各細胞種は最適な増殖のために特定の条件を必要とするので、各細胞種の培養に適した表面を選択することが重要である。 例えば 線維芽細胞 を生産し、居住する。 結合組織 したがって、コラーゲンやその他の繊維(結合組織の構成成分)を豊富に含む表面や足場は、線維芽細胞の培養に適しているという仮説が成り立つ。 つまり、細胞遊走アッセイのために線維芽細胞を培養する場合、コラーゲンでコーティングされた表面が良い選択ということになる。 しかし 表面コーティングの選択は細胞遊走に影響するか?

プラティパス・テクノロジーズの科学者たちは、新しい実験で、細胞培養のための表面コーティングの選択が細胞移動実験の結果に影響を与える可能性があることを実証した。  

オリス™ 細胞遊走試験(Cell Migration Assays)は、96ウェルプレート の中央に細胞のない検出ゾーンを作る「ストッパー」バリア を用いて細胞遊走実験を行います。 ストッパーを外すと、細胞は各ウェル中央の検出ゾーンに遊走します:

原則 オリスTM 細胞移動アッセイ:オリスTM ストッパーを使用し、中央に細胞を含まない検出ゾーン(赤点線円)を形成する。 20時間の培養後、細胞は検出ゾーンに移動する。

この実験では、HT1080という細胞株を使用した。 線維芽細胞 ヒト悪性腫瘍から単離された. 細胞はOris上でインキュベートされた。TM ウェルに5種類の生理活性表面をコーティングした細胞移動アッセイ:組織培養、コラーゲンI、フィブロネクチン、ポリ-L-リジン、基底膜抽出物(BME)。 細胞接着後、オリスTM ストッパーを外し、検出ゾーンへの細胞の移動を許可した。 その後、オリス®を添加せずに24時間培養した細胞を画像化した。TM ストッパー この実験の代表的な画像を以下に示す:

様々な生物活性コーティングを施した表面で培養した細胞(HT1080)の代表的な画像。 オリスTM ストッパーを使用し、中央に細胞のない検出ゾーンを作る。 24時間の培養後、細胞は検出ゾーンに移動する。で培養したHT1080細胞。 コラーゲンI 表面で培養した場合、他の表面で培養した場合よりも速く移動する。

これらの画像を目視で観察したところ、培養した細胞は、以下のように観察された。 コラーゲンI 他の生物活性表面で培養した細胞と比較して、検出領域へ深く移動した。 組織培養、フィブロネクチン、ポリ-L-リジン、基底膜エキス上で培養した細胞の遊走に顕著な差は見られなかった。 

各プレートから12個の異なるウェルを、細胞移動前と移動後に撮像し、無細胞領域の面積を以下の方法で測定した。 イメージジェイ. 遊走前後の無細胞域の面積の差を用いて、アッセイの面積閉鎖率を算出した。 これらの測定結果は以下のグラフに示されており、HT1080細胞はコラーゲンI中で、他のどの表面コーティングよりも高い遊走率を示すことが明確に示されている。 

異なる生物活性表面上でインキュベートした細胞の定量的移動。 これらのデータから、HT1080細胞を コラーゲンI は、より高い細胞遊走率を示した。 

結論として、表面コーティングの選択はHT1080細胞の細胞遊走に強い影響を与える。 コラーゲンIで培養した細胞は、他の表面で培養した細胞と比較して、最も速い細胞遊走速度を示した。 これらの結果は、表面コーティングの選択が細胞遊走の測定に重要な役割を果たしていることを示している。

詳細はこちら オリス細胞移動アッセイ.

その他の参考文献

確率的で不均一ながん細胞の移動:実験と理論

細胞の動き方とその理由