Enfermedad periodontal y migración celular
Los ensayos de migración celular permiten a los científicos e investigadores medir los patrones de migración celular. Tecnologías Platypus Ensayos de migración celular Oris Pro admiten muchos tipos de células diferentes con pocillos recubiertos de matriz extracelular. Además, pueden utilizarse tapones Oris para crear zonas de detección libres de células.
Un estudio de investigación sobre los efectos del zinc dual más arginina sobre el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) utilizó Platypus Technologies Ensayo Oris de migración celular. El TNF-α es una citocina presente en el tejido periodontal infectado. Esta citocina es capaz de dirigir la destrucción del tejido y el hueso, contribuyendo a las enfermedades periodontales. La enfermedad periodontal es una infección inflamatoria que puede tener graves consecuencias para la salud si no se trata. Se ha demostrado que esta enfermedad daña el tejido de las encías y afecta al hueso que soporta los dientes. Un patógeno conocido como bacteria anaerobia gramnegativa facilita la enfermedad periodontal, a la que sigue una respuesta inflamatoria de las células inmunitarias. En esta respuesta, las metaloproteinasas de la matriz (MMP) comienzan a degradar las proteínas de la matriz extracelular.
Se utilizó una línea celular de queratinocitos gingivales humanos inmortalizados B11 para indicar un posible efecto protector de la solución Dual Zinc plus Arginine. Las células se cultivaron con un medio de queratinocitos con factores de crecimiento y penicilina. Se utilizó la resistencia eléctrica transepitelial (TER) para cuantificar la integridad de la barrera queratinocitaria. Los queratinocitos desempeñan un papel importante en la prevención de patógenos al ayudar a construir la epidermis, que proporciona una barrera natural.
Se inmunotinciónaron queratinocitos con dos proteínas de unión estrecha (ocludina y zónula occudens-1) y se incubaron para permitir que se produjera la adhesión celular. Se utilizó la tinción de inmunofluorescencia para visualizar el efecto de Dual Zinc sobre las dos proteínas de unión estrecha. A continuación, las células se trataron o no con TNF-α y se midió la proliferación celular.
Se utilizó un kit de ensayo de migración celular Oris Pro para determinar la migración de queratinocitos cuando se exponían a Zinc Dual más Arginina. Las células se sembraron en una microplaca de 96 pocillos en la que los pocillos recubiertos de colágeno de tipo I con tapones proporcionaban un área de migración designada. La migración celular se determinó con un lector de microplacas.
Los resultados generados a partir del ensayo de migración indicaron que la exposición de los queratinocitos gingivales al TNF-α disminuía los valores de TER. También se observó un aumento del transporte paracelular de dextrano de 4,4 kDa (FD-4) conjugado con isotiocianato de fluoresceína. Las soluciones duales de zinc más arginina evitaron la disminución de los valores TER causada por el TNF-α. La figura siguiente ilustra cómo el zinc dual más arginina impidió la distribución celular irregular de las dos proteínas de la unión estrecha. El TNF-α provoca disfunciones en la barrera de queratinocitos gingivales a través de la producción de proteínas de función estrecha. La producción de proteínas de unión estrecha es eficaz debido a su capacidad para adherirse a otras moléculas de proteínas de unión estrecha. Las tinciones inmunofluorescentes muestran que el TNF-α por sí solo provocó una distribución irregular de las células, mientras que Dual Zinc más Arginina evitó que se produjera esta distribución.
Los resultados también indicaron que el TNF-α reduce la proliferación celular. Sin embargo, Dual Zinc más Arginina fue capaz de combatir esto permitiendo un aumento de la proliferación celular y de la migración celular.
Esta investigación indicó que el Zinc Dual más Arginina es capaz de prevenir con éxito los daños periodontales causados por el TNF-α.
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